Geri git   Türkiyenin Gıdacılar Topluluğu - Gıda - Gıda Mühendisleri > Kimya > Mikrobiyoloji
Connect with Facebook
Kayıt ol Arama Yeni Mesajlar Forumları Okundu Kabul Et

Cevapla

 

LinkBack Seçenekler Arama Stil
Alt 24-2009   #1
S Moderator
 
Gülsel ŞEN - ait Kullanıcı Resmi (Avatar)
 
Üyelik tarihi: 22-05-2008
Yaş: 43
Mesajlar: 1.128
Tecrübe Puanı: 82
Tecrübe Puanı: 5802
Tecrübe Derecesi : Gülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond repute
Gülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond reputeGülsel ŞEN has a reputation beyond repute
Standart Staphylococcus aureus aranması

1.AMAÇ ve KAPSAM

Tüm gıda numunelerinde S.aureus aranması amacını taşır.Staphylacoccus aureus; gram pozitif, yuvarlak, spor oluşturmayan, hareketsiz, katalaz pozitif, koagülaz pozitif bir bakteridir.Staphylococcus aureus; menenjit, septisemi ve yara iltihaplarına neden olmasının yanısıra, kusma, diare,bitkinlik ve terleme gibi belirtileri olan gıda zehirlenmelerine neden olur. Riskli gıdalar peynir, süt, krema, dondurma et ve et ürünleridir.

2. PRENSİP

S.aureus BP Agar’da bulunan potasyum telluriti indirger ve yumurta sarısını hidrolize eder.Bu nedenle yöntem besiyerinde etrafında zon bulunan siyah kolonilerin saptanarak koagülaz testi ile doğrulanması esasına dayanır.

3.ALET VE EKİPMANLAR

• Otoklav
• Sterilizatör ( 160+5 oC)
• İnkübatörler (35+1oC,)
• Analitik teraziler (0.01g hassasiyette)
• Su banyosu (80-100oC)
• Stomacher
• pH metre
• Bunzen beki
• Steril bıçak, pens,spatül, vb. malzemeler
• Tüp karıştırıcı
• Plastik steril petriler (15x90mm )
• Otomatik pipet ve steril pipet ucu
• Cam tüpler ve tüp sporlar
• Erlen ,beher,mezür vb. standart laboratuvar cam malzemesi
• Koloni sayacı
• Mikrodalga

4.KULLANILAN BESİYERLERİ

• MAXİMUM RECOVERY DİLUENT :
Formül :
Pepton : 1,0 g
Sodium clorür : 8,5 g
Distile su : 1 litre

Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. Otoklav sonrası pH 7+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir.

• BAIRD-PARKER MEDİUM
• Egg Yolk- Tellürite Emulsion :
Formül :
Tryptone : 10 g
Beef extract : 5 g
Yeast extract : 1 g
Sodium pyruvate : 10 g
Glycine : 12 g
Lithium chloride.6 H2O : 5 g
Agar : 20 g
Distile su : 1 litre

Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. 121oC’de 15 dakika otoklav edilir.Hazır besiyerindeki etiketine göre pH ayarlaması yapılır ve aseptik koşullarda 50oC de Egg Yolk- Tellürite Emulsion ilave edilir. Karıştırılarak petrilere dökülür.
• Staphylase Test yada liyofilize tavşan plazması

5.UYGULAMA

25 g(ml) örnek 225 ml (yada x numune miktarı x9 dilisyon sıvısı) Maximum Recovery Diluent ile gıda mikrobiyolojisi laboratuvar kurallarına uygun olarak homojenize edilir.1/10’luk dilüsyondan 0,4-0,3-0,3ml olarak önceden hazırlanmış BPA besiyeri petrilerine yayma yöntemine göre ekilir.Eğer numunedeki S.aureus sayısı yüksek bekleniyorsa seri dilisyonlar da yapılabilir.Ekim yapılan petriler 35+1oC de 45- 48 saat inkübasyona bırakılır.

48 saat sonra mat ortamda yuvarlak, konveks, pürüzsüz, dar, parlak zonlu bölge ile çevrili, 2-3mm çapındaki siyah-gri parlak koloniler muhtemel S. aureus kolonileridir.(bazı süt ürünleri ve yiyeceklerden identifiye edilen koloniler zonlu bölge oluşturmayabilir. )

5.1 Doğrulama Testi

Tipik kolonilere koagulaz testi uygulanır.Bunun için piyasada ticari olarak satılan koagülaz testler kullanılabildiği gibi liyofilize tavşan plazması da kullanılır.Hazır koagulaz testleri direk tipik koloniler alınıp uygulanabilir ve aglutinasyon oluşması gözlenir.,Liyofilize tavşan plazması kullanıldığında ise şüpheli koloniler küçük Brain Heart İnfusion Broth tüplerine alınıp 35 oC de18-24 saat zenginleştirdikten sonra üzerine sulandırılmış tavşan plazması eklenir ve 35 oC de inkübasyona bırakılır 6 saat sonra tüpler eğilip pıhtılaşmalar kontrol edilir.
Ek olarak aşağıdaki testlerde yapılabilir.

Biyokimyasal test Sonuç
Katalaz Testi +
Termonükleaz üretimi +
Glikozun anaerobik kullanımı +
Mannitolün anaerobik kullanımı +

6.HESAPLAMA
Staphylococcus aureus için tipik koloniler tespit edilip sayıldıktan sonra bu kolonileri temsil edecek şekilde kolonilere koagulaz testi uygulanır. Test sonucu pozitif ise sayılmış olan koloniler dillüsyon katsayısı ile çarpılarak St aureus sayısı kob/g (ml) olarak sonuç belirtilir.

7.KAYNAKLAR

•FDA/BAM, 2001
__________________
Bulutlar ağlamasa yeşillikler nasıl güler?
Mevlana
Gülsel ŞEN isimli Üye şimdilik offline konumundadır   Bu mesajdan alıntı yap
Cevapla


Konuyu Toplam 1 Üye okuyor. (0 Kayıtlı üye ve 1 Misafir)

 
Seçenekler Arama
Stil

Yetkileriniz
You may not post new threads
You may not post replies
You may not post attachments
You may not edit your posts

BB code is Açık
Smileler Açık
[IMG] Kodları Açık
HTML-KodlarıKapalı
Trackbacks are Açık
Pingbacks are Açık
Refbacks are Açık


Benzer Konular

Konu Konuyu Başlatan Forum Cevaplar Son Mesaj
Tüm Gıdalarda Enterobakteriacea aranması Akın52 Mikrobiyolojik Analiz 3 06-2015 03:23 PM
Sütte Sodyum Karbonat Aranması a.ozan Sütün Muhafaza Teknikleri ve Analizleri 3 04-2011 03:50 PM
Staphylococcus aureus Akın52 Mikrobiyolojik Analiz 2 30-2009 02:56 PM
staphylococcus aureus zeynep bagcı Mikrobiyoloji 1 29-2009 12:25 AM
Staphylococcus Aureus Muhittin YILMAZ Gıda Zehirlenmeleri 1 04-2008 01:01 AM



Şu anda saat : 08:47 PM.



Powered by vBulletin® Version 3.8.3
Copyright ©2000 - 2020, Jelsoft Enterprises Ltd.
LinkBacks Enabled by vBSEO 3.6.0 © 2011, Crawlability, Inc.