![]()
|
![]() |
![]() |
|
LinkBack | Seçenekler | Arama | Stil |
![]() |
#1 |
Moderator
Üyelik tarihi: 06-06-2008
Mesajlar: 34
Tecrübe Puanı: 14
Tecrübe Puanı: 110
Tecrübe Derecesi :
![]() ![]() ![]() ![]() |
![]() 1.ALET VE EKİPMANLAR •Analitik Terazi (0.01 g hassasiyette) •Otoklav •Sterilizatör (160 +/- 5 0C) •İnkübatörler (36 0C +/-1, 41,5 0C +/-1) •Su Banyosu (80-100 0C) •Stomacher •PH Metre •Bunzen Beki •Steril bıcak, pens, spatül vb.malzemeler •Tüp karıştırıcı •Steril petriler (15 x 90 mm) •Otomotik pipet ve steril pipet ucu •Cam tüpler ve tüp sporlar •Erlen, beher, mezür ve benzeri standart laboratuvar cam maddesi •Mikrodalga fırın •Mikroskop 2.KULLANILAN BESİYERLERİ VE HAZIRLANIŞLAR 2.1.Maximum Recovery Diluent : Formül : Pepton :1,0 g Sodium clorür :8,5 g Distile su :1 litre Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. Otoklav sonrası pH 7+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir. 2.2.Violet Red Bile Glukoz Agar (VRBGA): Formül: Yeast extract :3 g Peptone yada gelysate :7 g Bile salts yada bile salts no.3 :1,5 g Glukose :10 g NaCl :5 g Neutral red :0,03 g Crystal violet :0,002 g Agar :15 g Distile su :1000ml Hazır Besiyeri içeriği aseptik koşullarda steril erlenmayere tartılır. pH 6,8+0,2 olacak şekilde ayarlanır. Su banyosunda veya mikrodalga fırında ısıtılarak çözündürülür. 45+1oC‘de ekimi yapılmış petrilere dökülür. 2.3.Tuzlu Glukoz Agar : Formül: Tryptone : 2g Maya extraktı : 1g Glukoz : 10g NaCl : 5g Potasyum-mono-hidrojenfosfat : 0,3g Agar : 2,5g Bromtimolblue (%0,2lik ) :40ml (%0,2 lik Bromthymol blue: Bromthymoleblue 0,1g, 0,1N NaOH ve 47,5ml distilesu) Distile su : 1000ml Hazırlanan karışım ısıtılarak çözündürülür. Otoklav sonrası pH 7+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir. Petrilere aseptik koşullarda dökülür. Buzdolabında saklanır. 2,4.Nutrient Agar Formül : Beef extract : 3 g Peptone : 5 g Agar : 15 g Distile su : 1 litre Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrası pH 6.8+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 50 oC‘de aseptik koşullarda petrilere aktarılır. 2.5 Oksidaz test kiti Hazır kit kullanılmaktadır. 3.METOT 10 g(ml) örnek 90 ml (yada x numune miktarı x9 dilisyon sıvısı) Maximum Recovery Diluent ile gıda mikrobiyolojisi laboratuvar kurallarına uygun olarak homojenize edilir. 1/10’luk dilüsyondan 2 steril petri kutusuna 1’er ml konur. Eğer numunedeki entereobacteriacea sayısı yüksek bekleniyorsa seri dilisyonlar da yapılabilir Aseptik koşullarda hazırlanan VRBGA besiyeri ortalama 45oC’ye soğutularak dökülür ve karıştırılır. 35oC de 20-24 saat inkübasyona bırakılır. Sonuç olarak petrilerde oluşan kolonilerden menekşemsi zon oluşturan kolonilerin sayısı belirlenip kaydedilir. Tipik kolonilerden en az iki tanesine doğrulama testleri uygulanır. Not: Petrilerdeki koloni sayısı 25-250 arası olursa sayılabilir. 3.1Doğrulama Testleri VRBGA da üreyen tipik kolonilerden Nutrient agar yüzeyinde zenginleştirilir ve Tuzlu glukoz agara geçilir. Tuzlu glukoz agarın yüzeyi mineral yağ ile örtülür. 35-37oC de 20-24 saat inkübasyona bırakılır. Oksidaz testi : 5-10 saniye içinde koloninin koyu mor renge dönüşmesi pozitif reaksiyon kabul edilir.Oksidaz testi negatif ve Tuzlu glukoz agar sarı renge dönüşmüş ise koloniler Enterobakteriacea olarak kabul edilir. NOT: VRBG Agar besiyeri suda kaynatılarak çözülür. Besiyeri 2 dakikadan fazla kaynatılmamalıdır. Gerekirse, kaynamadan sonra pH , oda sıcaklığında 7,4 olacak şekilde ayarlanır. Besiyeri, otoklavda sterilize edilmez. içinde çözündürülecek saf su işlemden önce otoklavda sterilize edilir. Bu besiyeri kullanılmadan hemen önce hazırlanır. |
![]() |
![]() |
![]() |
#2 |
Junior Member
Üyelik tarihi: 18-12-2008
Mesajlar: 1
Tecrübe Puanı: 0
Tecrübe Puanı: 10
Tecrübe Derecesi :
![]() ![]() |
![]() salmonella hakkında bılgı
|
![]() |
![]() |
![]() |
Konuyu Toplam 1 Üye okuyor. (0 Kayıtlı üye ve 1 Misafir) |
|
Seçenekler | Arama |
Stil | |
|
|