Geri git   Türkiyenin Gıdacılar Topluluğu - Gıda - Gıda Mühendisleri > Labaratuvar Köşesi > Mikrobiyolojik Analiz
Connect with Facebook
Kayıt ol Arama Yeni Mesajlar Forumları Okundu Kabul Et

Cevapla

 

LinkBack Seçenekler Arama Stil
Alt 11-2008   #1
Moderator
 
Üyelik tarihi: 06-06-2008
Mesajlar: 34
Tecrübe Puanı: 14
Tecrübe Puanı: 110
Tecrübe Derecesi : Akın52 will become famous soon enoughAkın52 will become famous soon enough
Akın52 will become famous soon enoughAkın52 will become famous soon enough
Standart Enterobacteriacea


1.ALET VE EKİPMANLAR

•Analitik Terazi (0.01 g hassasiyette)
•Otoklav
•Sterilizatör (160 +/- 5 0C)
•İnkübatörler (36 0C +/-1, 41,5 0C +/-1)
•Su Banyosu (80-100 0C)
•Stomacher
•PH Metre
•Bunzen Beki
•Steril bıcak, pens, spatül vb.malzemeler
•Tüp karıştırıcı
•Steril petriler (15 x 90 mm)
•Otomotik pipet ve steril pipet ucu
•Cam tüpler ve tüp sporlar
•Erlen, beher, mezür ve benzeri standart laboratuvar cam maddesi
•Mikrodalga fırın
•Mikroskop

2.KULLANILAN BESİYERLERİ VE HAZIRLANIŞLAR
2.1.Maximum Recovery Diluent :

Formül :
Pepton :1,0 g
Sodium clorür :8,5 g
Distile su :1 litre

Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. Otoklav sonrası pH 7+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir.

2.2.Violet Red Bile Glukoz Agar (VRBGA):
Formül:

Yeast extract :3 g
Peptone yada gelysate :7 g
Bile salts yada bile salts no.3 :1,5 g
Glukose :10 g
NaCl :5 g
Neutral red :0,03 g
Crystal violet :0,002 g
Agar :15 g
Distile su :1000ml
Hazır Besiyeri içeriği aseptik koşullarda steril erlenmayere tartılır. pH 6,8+0,2 olacak şekilde ayarlanır. Su banyosunda veya mikrodalga fırında ısıtılarak çözündürülür. 45+1oC‘de ekimi yapılmış petrilere dökülür.

2.3.Tuzlu Glukoz Agar :
Formül:

Tryptone : 2g
Maya extraktı : 1g
Glukoz : 10g
NaCl : 5g
Potasyum-mono-hidrojenfosfat : 0,3g
Agar : 2,5g
Bromtimolblue (%0,2lik ) :40ml
(%0,2 lik Bromthymol blue: Bromthymoleblue 0,1g, 0,1N NaOH ve 47,5ml distilesu)
Distile su : 1000ml

Hazırlanan karışım ısıtılarak çözündürülür. Otoklav sonrası pH 7+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir. Petrilere aseptik koşullarda dökülür. Buzdolabında saklanır.

2,4.Nutrient Agar
Formül :
Beef extract : 3 g
Peptone : 5 g
Agar : 15 g
Distile su : 1 litre

Tartılan hazır besiyeri içeriği distile su ile ısıtılarak çözündürülür. 121+1oC‘de 15 dakika sterilize edilir. Otoklav sonrası pH 6.8+0,2 olacak şekilde ayarlanır. 50 oC‘de aseptik koşullarda petrilere aktarılır.

2.5 Oksidaz test kiti
Hazır kit kullanılmaktadır.

3.METOT
10 g(ml) örnek 90 ml (yada x numune miktarı x9 dilisyon sıvısı) Maximum Recovery Diluent ile gıda mikrobiyolojisi laboratuvar kurallarına uygun olarak homojenize edilir. 1/10’luk dilüsyondan 2 steril petri kutusuna 1’er ml konur. Eğer numunedeki entereobacteriacea sayısı yüksek bekleniyorsa seri dilisyonlar da yapılabilir Aseptik koşullarda hazırlanan VRBGA besiyeri ortalama 45oC’ye soğutularak dökülür ve karıştırılır. 35oC de 20-24 saat inkübasyona bırakılır. Sonuç olarak petrilerde oluşan kolonilerden menekşemsi zon oluşturan kolonilerin sayısı belirlenip kaydedilir. Tipik kolonilerden en az iki tanesine doğrulama testleri uygulanır.
Not: Petrilerdeki koloni sayısı 25-250 arası olursa sayılabilir.

3.1Doğrulama Testleri
VRBGA da üreyen tipik kolonilerden Nutrient agar yüzeyinde zenginleştirilir ve Tuzlu glukoz agara geçilir. Tuzlu glukoz agarın yüzeyi mineral yağ ile örtülür. 35-37oC de 20-24 saat inkübasyona bırakılır.

Oksidaz testi :
5-10 saniye içinde koloninin koyu mor renge dönüşmesi pozitif reaksiyon kabul edilir.Oksidaz testi negatif ve Tuzlu glukoz agar sarı renge dönüşmüş ise koloniler Enterobakteriacea olarak kabul edilir.

NOT: VRBG Agar besiyeri suda kaynatılarak çözülür. Besiyeri 2 dakikadan fazla kaynatılmamalıdır. Gerekirse, kaynamadan sonra pH , oda sıcaklığında 7,4 olacak şekilde ayarlanır.
Besiyeri, otoklavda sterilize edilmez. içinde çözündürülecek saf su işlemden önce otoklavda sterilize edilir.
Bu besiyeri kullanılmadan hemen önce hazırlanır.
Akın52 isimli Üye şimdilik offline konumundadır   Bu mesajdan alıntı yap
Alt 18-2008   #2
Junior Member
 
Üyelik tarihi: 18-12-2008
Mesajlar: 1
Tecrübe Puanı: 0
Tecrübe Puanı: 10
Tecrübe Derecesi : aşkısı is on a distinguished road
aşkısı is on a distinguished road
Standart

salmonella hakkında bılgı
aşkısı isimli Üye şimdilik offline konumundadır   Bu mesajdan alıntı yap
Cevapla


Konuyu Toplam 1 Üye okuyor. (0 Kayıtlı üye ve 1 Misafir)

 
Seçenekler Arama
Stil

Yetkileriniz
You may not post new threads
You may not post replies
You may not post attachments
You may not edit your posts

BB code is Açık
Smileler Açık
[IMG] Kodları Açık
HTML-KodlarıKapalı
Trackbacks are Açık
Pingbacks are Açık
Refbacks are Açık




Şu anda saat : 04:50 PM.



Powered by vBulletin® Version 3.8.3
Copyright ©2000 - 2020, Jelsoft Enterprises Ltd.
LinkBacks Enabled by vBSEO 3.6.0 © 2011, Crawlability, Inc.